MOPS|CAS:1132-61-2|在核酸检测和分析领域的应用

2022-11-29

MOPS|CAS:1132-61-2|在核酸检测和分析领域的应用

2022-11-29 来源:转载自第三方

3-吗啉丙磺酸(英文简称MOPS,CAS:1132-61-2)是分子式为:C7H15NO4S,分子量为209.26的一种有机物。3-吗啉丙磺酸是一种重要的生物缓冲剂,经常用于配置RNA电泳缓冲液,它不仅可以用作细胞培养基的缓冲体系,而且是常见的电泳缓冲液和蛋白纯化色谱缓冲液。CN114317704B专利中介绍了一种检测核酸分子中N6-甲基腺嘌呤的方法及试剂盒。MOPS在专利中主要用作缓冲液成分,本周,亚科股份小编介绍一种检测核酸分子中N6-甲基腺嘌呤的方法及试剂盒,具体步骤如下:

(1) 对待测核酸分子中鸟嘌呤的氨基进行保护,得到被保护的核酸分子。

(2) 在羰基化合物的存在下,使被保护的核酸分子与亚硝酸盐反应,将待测核酸分子中的腺嘌呤转化为次黄嘌呤;溶剂是水、2-(N-吗啉)乙磺酸(MES)缓冲液、醋酸钠缓冲液、3-(N-吗啡啉)丙磺酸(MOPS)缓冲液、哌嗪-1,4-二乙磺酸(PIPES)缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPPS)缓冲液或三羟甲基氨基甲烷(TRIS)缓冲液或其任意组合。

(3) 任选地,对步骤(2)中获得的产物进行脱保护。

(4) 检测上一步骤中获得的产品。

本发明利用亚硝酸盐和羰基化合物催化腺嘌呤脱氨转化为次黄嘌呤,而N6-甲基腺嘌呤因其化学性质稳定无法脱氨。因此,本申请的方法通过分析转化前后腺嘌呤或次黄嘌呤的信号,实现m6A修饰水平或m6A位点的检测。该方法灵敏度高、定量准确,且能在单碱基水平实现全基因组或全转录组上N6-甲基腺嘌呤的检测。


参考文献

CN114317704B 检测核酸分子中N6-甲基腺嘌呤的方法及试剂盒.


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